ВЛИЯНИЕ МЕТОДА ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ ГЕМОКОРРЕКЦИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ МАГНИТОУПРАВЛЯЕМОГО СОРБЕНТА «МУС-Б»* НА ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ

 

Белоусов А.Н.

 

Актуальность

Одним из направлений в исследовании и расшифровке патогенеза ряда заболеваний и эффективности проводимой терапии является изучение процесса свободнорадикального перекисного окисления липидов (СРО) [1]. Интенсивность свободнорадикального перекисного окисления липидов характеризует равновесие неферментативных окислительных процессов и антиокислительных систем. В норме это равновесие удерживается на стационарном уровне за счет активности антиоксидантных систем. При развитии различного рода патологических состояний возникают сдвиги метаболического гомеостаза, равновесия между антирадикальными и прорадикальными продуктами, а также нарушение физико-химических свойств тканевых структур. К таким патологическим изменениям, лежащим в основе развития некоторых заболеваний, относятся также повреждения мембран, инактивация ферментов, гибель клеток, избыточное образование свободных радикалов. В основном это реакционноспособные атомы и молекулы кислорода: супероксидный радикал О2-1 , перекись водорода Н2О2 , гидроксильный радикал ОН-, а также синглетный кислород 1О2 [2]. Cвободнорадикальные формы субстратов и О2 начинают образовываться в избыточных концентрациях как следствие несостоятельности антиоксидантной системы клеток, которая представлена ферментами (супероксиддисмутазой, каталазой, пероксидазой), и веществами, обладающими антиокислительной активностью (токоферолом, убихиноном и др.). Интенсификация этих реакций может вызвать повреждение мембраны клетки, ее барьерной, рецепторной и обменной функции, модификацию молекул нуклеиновых кислот и белков, что ведет к мутациям и инактивации ферментов. Содержание гидроперекисей липидов (ГПЛ), а также липидных фракций крови имеет важное диагностическое значение для оценки активации процесса ПОЛ, который наблюдается при развитии ряда заболеваний: увеличение ГПЛ в 1,5-2 раза в крови больных при холецистите, гепатите, панкреатите, сахарном диабете, атеросклерозе, ишемической болезни сердца [3-5]. Определение влияния эктракорпоральных методов гемокоррекций на липидное состояние крови имеет важное прогнозирующее значение в лечении больных. Известно, что свободнорадикальное окисление ведет к образованию перекисей, кетонов, альдегидов и т.д. путем непосредственного переноса кислорода на субстрат. Решающее значение в этих процессах играет ПОЛ.

Материалы и методы

В анестезиолого-реанимационном отделении ОКБ г. Харькова с 1996 по 1999 г. по поводу синдрома интоксикации, обусловленного патологией органов гепатодуоденопанкреальной зоны 70 больным в ранний послеоперационный период однократно проводился сеанс экстракорпоральной гемокоррекции с применением магнитоуправляемого сорбента (МУС-Б). Экстракорпоральная гемокоррекция осуществлялась статическим методом посредством перфузии крови через МУС-Б [6,7].

Объект исследования — плазма крови исследуемых больных.

Для обнаружения свободнорадикальных продуктов измеряли интенсивность хемилюминесценции [8]. Метод хемилюминесценции может быть использован при диагностике различных заболеваний, определении тяжести патологического процесса и в объективной оценке эффективности и радикальности лечебных мероприятий. Интенсивность СРО липидов измерялась методом хемилюминесценции на квантометрической установке ННЦ ХФТИ с ФЭУ-140 [3]. Хемилюминесценция спонтанная, синглетного кислорода, индуцированная раствором перекиси водорода, люминолом осуществлялась в соответствии с биохимическими методиками [4,9,10]. Для измерения квантов света, образующихся в реакции взаимодействия синглетного кислорода с соединениями высокой электронной плотности, использовали интерференционный светофильтр с длиной волны в области 630 нм, который размещался непосредственно над торцом фотокатода ФЭУ [5,11]. При изучении влияния экстракорпоральной гемокоррекции на интенсивность процессов переоксидации липидов в крови исследовали уровень продуктов ПОЛ - диенового конъюгата (ДК) и малонового диальдегида (МДА) методом биохимического анализа: ДК - при максимуме поглощения в ультрафиолетовой области спектра l = 233-234 нм [12, 13]; МДА - при максимуме поглощения l = 532 нм [14,15]. Исследования проводились на 6 этапах: исходные данные, показатели in vitro, 1-е, 4-е, 15-е и 32-е сутки. Результаты обработаны параметрическим методом вариационной статистики согласно [16,17].

Результаты исследования

На исходном этапе у всех обследованных больных регистрировался изначально высокий уровень интенсивности СРО и ПОЛ. Однако после экстракорпоральной гемокоррекции в плазме больных in vitro и in vivo достоверно выявлено резкое снижение интенсивности свечения при всех видах хемилюминесцентных реакций, уменьш?ение количества продуктов ПОЛ. Получены данные, свидетельствующие о процессе ингибирования реакций образования свободнорадикальных форм субстратов и О2 . Количество продуктов ПОЛ составило: ДК - 64,2±3,4 ммоль/л (при норме - 49-52,4 ммоль/л); МДА - 20,1±0,05 ммоль/л (при норме - 10,2±1,0 ммоль/л). В результате применения метода экстракорпоральной гемокоррекции на этапе in vitro ДК в среднем снижались - на 14,1±1,6 ммоль/л; МДА - на 9,2±0,05 ммоль/л. На 4-е сутки наблюдения у 38 (54,3%) больных показатели ДК в среднем уменьшились на 8,1±0,8 ммоль/л, МДА - на 9,4±0,05 ммоль/л. У 18 (25,7 %) больных на 4-е сутки наблюдения показатели ПОЛ возвращались к норме. На 15-е сутки наблюдения количество ДК и МДА возвращалось к норме у всех обследованных. Учитывая, что процессы ПОЛ в значительной степени отражают функциональное состояние клеточных мембранных структур, можно полагать, что проведенный сеанс экстракорпоральной гемокоррекции с применением МУС не вызывает нарушений клеточного метаболизма, напротив, уже на этапе in vitro количество ДК и МДА активно корригируется. На последующих этапах исследования (in vivo) отмечается относительно быстрое возвращение количества продуктов ПОЛ к нормальным величинам. Проведенные исследования, позволяют констатировать, что использование метода экстракорпоральной гемокоррекции с применением МУС приводит к снижению активности ПОЛ и свободнорадикальных процессов у обследуемого контингента больных.

Вывод

Таким образом, метод экстракорпоральной гемокоррекции с использованием МУС предупреждает развитие окислительного стресса, нормализует функциональное состояние мембранных структур клеток через процессы регуляции свободнорадикального окисления и ПОЛ.

Список литературы 

1. Журавлев А.И., Куравлева А.И. Сверхслабое свечение сыворотки крови и его значение в комплексной диагностике. М.: Медицина, 1975. 128 с.

 2. Абрамова Я. И., Оксенгендлер Г. И. Человек и противоокислительные вещества. Л.: Наука, 1985. 230 с.

3. Безкоровайная О.И., Дикий Н.П., Медведева Е.П., Шляхов Н.А. Физико-аналитический комплекс в медицине. Препринт ХФТИ 94-13. Харьков, 1994. 17 с.

 4. Лозовская Е.Л., Сапежинский И.И. Сравнительная эффективность некоторых лекарственных препаратов, как акцепторов супероксидных радикалов. М. Биофизика, 1994, т.38, вып.1, с 31-35.
 5. Бурлакова Е.Б., Алесенко А.В., Молочкина Е.М. и др. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. М.: Наука, 1975.-211 с.

6. Держпатент № 24322А Білоусов А.М. Сорбент для екстракорпоральної детоксикації біологічних рідин. Опубл. 17.07.98.

7. Держпатент № 24183А Білоусов А.М. Спосіб екстракорпоральної детоксикації біологічних рідин. Опубл. 17.07.98.

 8. Серкиз Я.И., Чеботарев Е.Е., Барабой В.А. и др. Хемилюминесценция крови в экспериментальной и клинической онкологии - Киев. Наукова думка, 1984. 184 с.
 9. Журавлев А.И. Спонтанная биохемилюминесценция. Тр. МОИП; 1997, т LVIII, с 3-30.
 10. Сперанская Е.Ч., Ермалицкий Ф.А. Хемилюминесцентное определение анион-радикала кислорода. М. Биофизика, 1994, т.36, вып.4, с 569-570.
 11. Фут X. Фотосенсибилизированное окисление и синглетный кислород М.: Мир, 1998, с 96-150.
 12. Гаврилов Б.Д., Мишкорудая М.И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови. Лаб. дело. Киев, 1983; 3: с 33-36.
 13. Меньшикова В.В. Лабораторные исследовательские приемы в клинике. М.: "Медицина". 1987. 325 с.
 14. Федорова Т.М., Коршунова Т.С., Ларский Е.Г. Реакция с тиобарбитуровой кислотой для определения МДА крови методом фотометрии. Лаб. дело. 1983; 3: с 25-28.
 15. Якушев В.С., Лифшиц Р.Н. Влияние гистидина на содержание МДА в тканях при экспериментальном инфаркте миокарда. Вопросы мед. химии. 1976; т. 22, 4: с 476-478.
 16. Каминский Л.С. Статистическая обработка лабораторных и клинических данных. Применение статистики в научной и практической работе врача. Л.: Медицина, 1991. 252 с.
 17. Мерков А.Н. Демографическая статистика: Краткое пособие для врачей. - М.: Медицина, 1992. 213 с.
 
Резюме
Представленный метод экстракорпоральной гемокоррекции с использованием магнитоуправляемого сорбента у больных с синдромом интоксикации приводит к снижению активности ПОЛ и свободнорадикальных процессов, предупреждает развитие окислительного стресса, нормализует функциональное состояние мембранных структур клеток.
Ключевые слова: экстракорпоральная гемокоррекция, магнитоуправляемый сорбент, предупреждает окислительный стресс, нормализация мембранных структур, снижение активности СРО и ПОЛ.
 
Summary
The study of intensity free radical processes and products peroxy oxidation of lipides as for result of application a method extracorporal haemocorrection with used magnet-controlled sorbent:
The presented method extracorporal haemocorrection with used magnet-controlled sorbent decrease of activity a POL and FRO, prevent of oxydation stress, normalizes functional status of membrane structures a ceels the patients with syndromes intoxycation.
Key words: extracorporal haemocorrection, magnet-controlled sorbent, prevent of oxydation stress, normalization membrane structures, decrease of activity a POL and FRO.
 

Примечание: *Решение заседания Президии Ученого медицинского совета МОЗ Украины от 22 декабря 2000г. Протокол №48.

 


© 2008 — 2019 «Лаборатория прикладных нанотехнологий»
Разработка и поддержание сайта - seozavr.com